Risoluzione delle subunità dell'enzima trombina come Agapurin dal veleno di Agkistrodon halys e sequenziamento dei residui di amminoacidi

[Abstract] Obiettivo Determinare i 15 residui amminoacidici N-terminali di due subunità simili di Agacutin.Le due subunità della molecola enzimatica devono essere divise per ottenere la singola catena peptidica della subunità e sequenziate.Metodi Agacutin altamente purificato è stato ottenuto con metodo biochimico.I campioni di subunità singola per l'identificazione e il sequenziamento sono stati preparati mediante separazione elettroforetica SDS-PAGE, recupero della striscia adesiva di subunità e tecnologia di elettrotrasferimento della membrana PVDF.Quest'ultimo ha determinato 15 residui di amminoacidi all'N-terminale della subunità mediante il metodo di degradazione di Edman.Risultati La sequenza della subunità grande (16 kDa) era DCSSGWSSYEEHQYY e quella della subunità piccola (15 kDa) era DSSGWSSYEGHEYYV.Conclusione I risultati del sequenziamento hanno mostrato che Agacutin era un nuovo enzima simile alla trombina del veleno di serpente cercando nel database NCBI.